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DiD細胞膜熒光探針

DiD perchlorate *Oil* [1,1’-Dioctadecyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindodicarbocyanine perchlorate]

Biotech Grade

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 10mg        680.00

 25mg        1360.00

 100mg       5100.00

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產品簡介：

     生化研究專用。DiD染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強，這類染料有著很高的淬滅常數和激發態壽命。一旦對細胞染色，這類染料在整個細胞膜上擴散，濃度時可以使整個細胞膜染色。DiD(紅色熒光)這使得可以用來對活細胞進行成像和流式分析。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發，有著比DiI更長的激發波長和發射波長，在細胞和組織染色中更有價值。 EX/EM644/663nm

別名：DiD高氯酸鹽

分子量：959.91

CAS： 127274-91-3

使用方法

1. DiD細胞膜染色液制備

(1)配置DMSO或EtOH 儲存液：儲存液用 DMSO或EtOH配置濃度1～5 mM。

注意：未使用的儲存液保存在-20 oC，避免反復凍融。

(2)工作液制備：用合適的緩沖液(如：無血清培養基，HBSS或PBS)稀釋儲存液，配制濃度為1～5 μM的工作液。

　　注意：工作液的終濃度是根據不同細胞和實驗的經驗來配制。可以從推薦濃度的十倍以上尋找條件。

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2. 懸浮細胞染色

(1)懸浮細胞密度為 1 × 106/mL加入到工作液中。

(2)在37 ℃培養細胞 2～20分鐘，不同的細胞培養時間不同。

(3)染色細胞試管在1000～1500轉離心5分鐘。

(4)傾倒上清液，再次緩慢加入預溫37℃的培養液。

(5)重復(3)，(4)步驟兩次以上。

3. 粘壁細胞的染色

(1)使粘壁的細胞在無菌實驗室培養。

(2)從培養基中移走蓋玻片，吸走過量培養液，將蓋玻片放在潮濕的環境中。

3)在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液，輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。

(4)在37 ℃培養細胞 2～20分鐘，不同的細胞培養時間不同。

(5)吸干染料工作液，用培養液洗蓋玻片2～3次，每次用預溫的培養基覆蓋所有細胞，培養5～10分鐘，然后吸干培養基。

4. 顯微鏡檢測

(1)多色染料的同時檢測，濾光器按照以下設定：

　　a) DiI和DiD=Omega XF92，Chroma 51007;

　　b) DiI，DiO和DiD=Omega XF93，Chroma 61005

　5. 流式細胞儀的檢測

　　DiD染色的細胞可以分別用經典的FL1流式細胞儀檢測。

保存：-20°C干燥避光保存
有效期：12個月

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